> Habari > Habari za Viwanda

Kwa nini utamaduni wa seli husafisha seli nyekundu za damu kwanza?

2022-12-23

Utangulizi wa kimsingi
Erythrocyte lysate ni mojawapo ya njia rahisi na rahisi zaidi za kuondoa seli nyekundu za damu, yaani, kugawanya seli nyekundu za damu na lysate, ambayo haiharibu seli za nucleated na inaweza kuondoa kikamilifu seli nyekundu za damu. Lysate cleavage ni njia nyepesi ya kuondoa seli nyekundu za damu, ambayo hutumiwa sana kutenganisha na kusafisha seli za tishu zinazotawanywa na digestion ya enzyme, kutenganisha na utakaso wa lymphocytes, na kuondolewa kwa seli nyekundu za damu katika majaribio ya protini ya tishu na nucleic. uchimbaji wa asidi. Seli za tishu zilizopatikana kwa lysate ya seli nyekundu za damu hazina seli nyekundu za damu, na zinaweza kutumika zaidi kwa utamaduni wa msingi, mchanganyiko wa seli, cytometry ya mtiririko, mgawanyiko na uchimbaji wa asidi ya nucleic na protini, nk.

Maagizo ya matumizi
Sampuli ya seli ya tishu
1. Tishu safi ziliyeyushwa na kongosho/enzyme au collagenase na kutawanywa katika kusimamishwa kwa seli moja, na supernatant ilitupwa kwa centrifugation.

2. Chukua lysate ya ELS kutoka kwenye jokofu saa 4â, ongeza ELS lysate kwenye precipitate ya seli katika uwiano wa 1:3-5 (ongeza 3-5ml ya lysate hadi 1ml ya seli iliyounganishwa), piga kwa upole na kuchanganya.

3. Centrifuge saa 800-1000rpm kwa dakika 5-8 na uondoe kioevu cha juu cha rangi nyekundu.

4. Sehemu ya mvua ilikusanywa na kuwekwa katikati na suluhisho la Hank au suluhisho la utamaduni lisilo na seramu kwa mara 2-3.

5, ikiwa ufa haujakamilika/umekamilika unaweza kurudiwa hatua ya 2 na 3.

6. Seli za kusimamishwa kwa majaribio yaliyofuata; Ikiwa RNA imetolewa, ni bora kufanya hivyo katika suluhisho iliyoandaliwa kutoka Hatua ya 4 kwa kutumia maji ya DEPC

Seli nyekundu za damu zina mzunguko mfupi sana wa maisha, siku 120 tu, lakini huzaa damu haraka sana, na katika kesi hii zina uwezo wa mgawanyiko wa seli, na ndio seli zinazogawanya haraka kuliko zote, kwa hivyo seli hii ni ya thamani sana. kwa hivyo ni muhimu sana kwa utamaduni wa seli. Ni rahisi sana, haina organelles yoyote ndani yake, tu utando wa seli na protini.

Iliyotangulia:Je, kazi za ELISA kit ni nini?

Inayofuata:Mahitaji ya reagent na uwakilishi wa msingi wa mkusanyiko wa suluhisho.